谷氨酸（Glu）含量检测试剂盒

标题：谷氨酸（Glu）含量检测试剂盒

产品概述

谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：液体50mL×2瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×2瓶， 4℃保存；临用前每瓶加入5mL双蒸水，用不完的试剂仍 4℃保存。

谷氨酸提取：

细菌、细胞或组织样品

收集细胞或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每1000万细菌或细胞加入2mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）， 8000g，常温离心10min，取上清待测。

称取约0.2g组织，加入2mL试剂一进行冰浴匀浆， 8000g，常温离心10min，取上清待测。

测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
2. 在有盖EP管中加入下列试剂：

混匀，90℃水浴20min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却，于570nm波长处比色，△A=A测定管-A对照管。对照管只要做一管。

注意事项：

为提高检测灵敏度，测定管的吸光值应小于1，若大于1则需要将上清液用试剂一稀释至适当倍数后测定。

谷氨酸含量计算：

1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0328x- 2.423； x为谷氨酸含量（µg/mL），y为吸光值。

2、按照蛋白浓度计算

谷氨酸含量（µg/mg）=(△A +2.423)÷0.0328÷Cpr=30.49×(△A+2.423) ÷Cpr

3、按照样品质量计算

谷氨酸含量（µg/g鲜重）=(△A +2.423)÷0.0328÷(W÷V样总）=60.98×(△A+2.423) ÷W

4、按照细菌或细胞密度计算

谷氨酸含量（μg/10⁴ cell）＝(△A +2.423)÷0.0328÷（1000÷V样总）=0.061×(△A+2.423)

V样总：加入提取液体积，2mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；1000：细菌或细胞总数，1000万。

注意：该试剂盒仅适用于发酵液或组织中谷氨酸含量测定，检测下限为70µg/mL。

谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒