谷氨酸合成酶（GOGAT）检测试剂盒

标题：谷氨酸合成酶（GOGAT）检测试剂盒

产品概述

谷氨酸合成酶(GOGAT)检测试剂盒

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体60mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1支，4℃保存；

试剂三：粉剂×1支，4℃保存；

试剂四：粉剂×1支，-20℃保存。

粗酶液提取：

1、收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次）；8000g4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

2、称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2. 样本测定

（1）工作液的配制：临用前将试剂二、三、四转移到试剂一中混合溶解，置于37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴5min；

（2）取1mL工作液和0.1mL样本于1mL比色皿中，混匀，加样本的同时开始计时，在340 nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1和5分20秒时的吸光度A2，计算ΔA=A1-A2。

谷氨酸合成酶(GOGAT)检测试剂盒