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标题：蛋白质羰基检测试剂盒
产品概述
蛋白质羰基检测试剂盒
自备实验用品及仪器
天平、恒温水浴锅、低温离心机、漩涡震荡仪、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿和蒸馏水，无水乙醇，乙酸乙酯。
试剂组成和配制
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根据样品数，每支加1mL水溶解，每支为10个样品用量）
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：根据测定样品量，将乙酸乙酯和无水乙醇等体积混合。
试剂六：液体100mL×1瓶，4℃保存。
样品处理
组织样品：称取约0.1g组织样品，加入1mL提取液，充分匀浆后于4℃，5000rpm离心10min，取上清，加入0.1mL试剂一，室温放置10min，4℃，12000rpm离心10min，取上清，然后取20μL测定蛋白含量，剩余的作为待测样品。
测定步骤和操作表
| 空白管 | 测定管 |
样品（mL） | 0.2 | 0.2 |
试剂二（mL） |
| 0.4 |
试剂三（mL） | 0.4 |
|
混匀，37℃避光反应1h | ||
试剂四（mL） | 0.5 | 0.5 |
静置5min，4℃，12000rpm离心15min，弃上清，留沉淀 | ||
试剂五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩涡混匀，4℃，12000rpm离心10min，弃上清，留沉淀 | ||
试剂五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩涡混匀，4℃，12000rpm离心10min，弃上清，留沉淀 | ||
试剂五（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩涡混匀，4℃，12000rpm离心10min，弃上清，留沉淀 | ||
试剂六（mL） | 1.0 | 1.0 |
漩涡混匀，37℃温育15min，沉淀全部溶解后，4℃，12000rpm离心15min，取上清，1mL石英比色皿，试剂六调零，测定OD370 | ||
计算公式
蛋白质羰基含量（μmol/mg prot）= 227.27×（OD370测定管－OD370测定管）÷样品蛋白质浓度注意事项：
1. 试剂一使用之前根据要测定的样品数现配，配置好后4℃保存，若变为黑色，则不能使用。
2. 试剂二见光易分解，反应需避光。
蛋白质羰基检测试剂盒
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13047500758
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