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蛋白含量检测试剂盒

更新时间:2019-11-07

简要描述:

测定意义
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理
强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
蛋白含量检测试剂盒

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蛋白含量检测试剂盒

自备仪器和用品

酶标仪、移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一:液体×1瓶,4保存。

标准品:液体×1瓶,5 mg/mL4保存。

样品中可溶性蛋白质提取

液体样品:澄清无色的液体样品可以直接测定。

组织样品:准确称取约0.1 g样品,加1mL提取液(根据需要,可以用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水提取),冰浴匀浆,10000rpm4离心10min,取上清,即待测液。

测定

1. 酶标仪预热30 min以上,调节波长到540nm,蒸馏水调零。

2. 空白孔:取酶标板,在空白孔中加入20 μ L蒸馏水180 μ L试剂一,混匀后室温静置15 min,于540nm测定吸光度,记为A空白。

3. 标准孔:取酶标板,在标准孔中加入20 μ L标准液180 μ L试剂一,混匀后室温静置15 min,于540 nm测定吸光度,记为A标准。

4. 测定孔:取酶标板,在测定孔中加入20 μ L待测液180 μ L试剂一,混匀后室温静置15 min,于540nm测定吸光度,记为A测定。

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