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淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

描述:测定意义
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是参与支链淀粉合成的关键酶,测定SBE活性在淀粉生物合成、优质农作物品种选育和品质遗传改良研究中具有重要意义。
测定原理
淀粉和diian结合后在660nm有特征光吸收,SBE可切断支链淀粉侧支,从而降低了淀粉-dian复合物在660nm吸收值,一定时间内吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2019-11-07
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产品详情/ PRODUCT DETAIL

标题:淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

产品概述

淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

需自备的的仪器和用品

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制

提取液液体60mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体20mL×1瓶,4保存;

试剂二:粉剂×2支,4保存;临用前每支加入1mL双蒸水,充分溶解后备用;

试剂三:液体25mL×1瓶,4保存;

试剂四:液体5mL×1瓶,4保存;

粗酶液提取

称取约0.1g组织加入1mL提取液,冰浴中匀浆。15000g 4离心15min,取上清,置冰上待测。

测定步骤

试剂名称(μL

对照管

测定管

煮沸1min后灭活的粗酶液

250

 

粗酶液

 

250

试剂一

320

320

试剂二

30

30

混匀,37准确保温20 min,置沸水浴中1 min终止反应(盖紧防止水分散失),冷却

试剂三

500

500

试剂四

40

40

混匀,室温静置10min,用蒸馏水调零,660nm读取各管吸光值。

注意:

1可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行1min沸水浴处理。

2试剂一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。

SBE活力单位的计算

方法(一)按照蛋白浓度计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。

  1. 活性(U/mg prot=A对照管-A测定管)/A对照管÷蛋白浓度(mg/mL) ×100

方法(二)按照样本鲜重计算

单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。

SBE活性(U/g 鲜重=A对照管-A测定管)/A对照管÷样本鲜重(g/mL) ×100

 

淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒

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