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标题:淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒
产品概述
淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒
需自备的的仪器和用品
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水
试剂的组成和配制
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×2支,4℃保存;临用前每支加入1mL双蒸水,充分溶解后备用;
试剂三:液体25mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体5mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
称取约0.1g组织加入1mL提取液,冰浴中匀浆。15000g ,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
测定步骤
试剂名称(μL) | 对照管 | 测定管 |
煮沸1min后灭活的粗酶液 | 250 |
|
粗酶液 |
| 250 |
试剂一 | 320 | 320 |
试剂二 | 30 | 30 |
混匀,37℃准确保温20 min,置沸水浴中1 min终止反应(盖紧防止水分散失),冷却
试剂三 | 500 | 500 |
试剂四 | 40 | 40 |
混匀,室温静置10min,用蒸馏水调零,660nm处读取各管吸光值。
注意:
1、可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行1min沸水浴处理。
2、试剂一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。
SBE活力单位的计算
方法(一)按照蛋白浓度计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。
方法(二)按照样本鲜重计算
单位的定义:以波长660nm的吸光度下降百分率表示,每g组织在反应体系中每降低1%dian蓝值为一个酶活性单位。
SBE活性(U/g 鲜重)=(A对照管-A测定管)/A对照管÷样本鲜重(g/mL) ×100
淀粉分支酶(SBE)检测试剂盒
025-65010873
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