更新时间:2019-11-07
测定意义生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。测定原理超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2-含量。超氧阴离子检测试剂盒
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超氧阴离子检测试剂盒
自备实验用品及仪器
天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂四:自备。
超氧阴离子提取
测定操作表
| 对照管 | 测定管 |
样本(mL) |
| 0.2 |
提取液(mL) | 0.5 | 0.3 |
试剂一(mL) | 0.4 | 0.4 |
混匀,37℃水浴20min | ||
试剂二(mL) | 0.3 | 0.3 |
试剂三(mL) | 0.3 | 0.3 |
混匀,37℃水浴20min | ||
试剂四(mL) | 0.5 | 0.5 |
混匀,8000rpm,25℃,离心5min,小心吸取上层水相1mL,对照管调零,1mL比色皿,测定A530。 |
超氧阴离子检测试剂盒