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超氧阴离子检测试剂盒

更新时间:2019-11-07

简要描述:

测定意义
生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。
测定原理
超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2-含量。
超氧阴离子检测试剂盒

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超氧阴离子检测试剂盒

自备实验用品及仪器

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液:液体100mL×1瓶,4保存。

试剂一:液体20mL×1瓶,4保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:自备。

超氧阴离子提取

  1. 植物、动物组织:称取约0.1g样本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm4℃,离心20min,取20μL上清测定蛋白含量,其余上清作为待测样本。
  2. 血清或培养液:直接测定。

测定操作表

 

对照管

测定管

样本(mL

 

0.2

提取液(mL

0.5

0.3

试剂一(mL)

0.4

0.4

混匀,37℃水浴20min

试剂二(mL

0.3

0.3

试剂三(mL

0.3

0.3

混匀,37℃水浴20min

试剂四(mL

0.5

0.5

混匀,8000rpm25℃,离心5min,小心吸取上层水相1mL,对照管调零,1mL比色皿,测定A530

超氧阴离子检测试剂盒

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