超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒

超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒

测定原理：

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O^2-.)，O^2-.可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在560nm处有吸收；SOD可清除O^2-.，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明SOD活性愈低，反之活性越高。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

试剂的组成和配制：

提取液：60mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：15mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×5瓶，4℃保存，用时每支加5.4mL双蒸水，充分溶解，现配现用；

试剂三：液体350uL×1支，4℃保存；

试剂四：液体10mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备 ：

收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。

测定步骤和操作表：

充分混匀，室温静置30min后，加入1mL玻璃比色皿，560nm处测定各管吸光值。

注意事项：

1、测定前将试剂一、二和四室温放置，使试剂的温度不低于室温后再测定。

2、试剂三为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

3、对照管只需要做一管。

超氧化物歧化酶(SOD)检测试剂盒