丙酮酸（PA）检测试剂盒

更新时间：2019-11-07

简要描述：

测定意义：
丙酮酸通过乙酰CoA连接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代谢，起着重要的枢纽作用。
测定原理：
丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙，在碱性溶液中呈樱红色。
丙酮酸（PA）检测试剂盒

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丙酮酸(PA)检测试剂盒

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体5mL×1瓶， 4℃保存；

试剂二：液体25mL×1瓶， 4℃保存。

丙酮酸提取：

1、细菌、细胞或组织样品

收集细胞或细胞到离心管内，离心后弃上清；每100万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次），静置30min， 4000g，常温离心10min，取上清待测。

称取约0.1g组织，加入1mL提取液匀浆，静置30min，4000g，常温离心10min，取上清待测。

2、血清（浆）样品

取100μL血清（浆）加入1mL提取液，充分混匀，静置30min， 4000g，常温离心10min，取上清待测。

测定步骤：

1、取300μL上清液+100μL试剂一于1.5mL EP管中，混匀，静置2min。

2、加入500μL试剂二，混匀，于520nm波长处，用蒸馏水调零，记录测定管吸光值A。

丙酮酸(PA)检测试剂盒

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