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标题:乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
产品概述
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:30mL×1瓶, 4℃保存;
试剂一:液体15 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:粉剂×1支,-20℃保存,用时加入1.3 mL双蒸水充分溶解备用,配好后-20 ℃保存,可保存两周,禁止反复冻融;
试剂三:液体15 mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:液体50 mL×1瓶L,4℃保存;
样品测定的准备:
1、 细菌、细胞或组织样品的制备 :
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,弃上清,按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次)。8000g,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:称取约0.1g组织,加入1mL提取液或者生理盐水进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
测定操作表(在1mL EP管中反应):
试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 |
待测样本 | 50 | 50 |
试剂一 | 250 | 250 |
试剂二 | 50 |
|
蒸馏水 |
| 50 |
充分混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴15min
试剂三 | 250 | 250 |
充分混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴15min
试剂四 | 750 | 750 |
充分混匀,室温静置3分钟,450 nm下测定吸光度
注意事项:
1、粗酶液的提取必须在0℃ - 4℃中操做完成,以防止酶变性失活。测定过程中样本﹑试剂二和标准应用液必须在冰上放置。
3、由于每个样本都要做测定管和对照管,因此本试剂盒50管可测24个样本。
乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒
025-65010873
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