海藻糖酶检测试剂盒

描述：测定意义：
THL（EC 3.2.1.28）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。海藻糖酶主要功能在于生物体分解海藻糖生成葡萄糖而直接用于能量供应。
测定原理：
采用3.5－二硝基水杨酸法测定THL催化海藻糖产生的还原糖的含量。还原糖与3.5－二硝基水杨酸共热生成棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比，由此判断THL活性的高低。
海藻糖酶检测试剂盒

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更新时间：2019-11-07
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标题：海藻糖酶检测试剂盒

产品概述

海藻糖酶检测试剂盒

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；

试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存，用时加入2.5mL试剂一，充分溶解，现配先用；

试剂三：液体20mL×1瓶，4℃保存；

试剂四：液体20mL×1瓶，常温保存；

样品测定的准备：

1、细菌或细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每400万细菌或细胞加入1mL提取液充分匀浆以破碎并裂解细胞（功率20％，超声3S秒，间隔10S，重复30次）；8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：称取约0.1g组织加入1mL提取液，冰浴中匀浆。8000g ，4℃下离心10min，取上清，置冰上待测。

加样表和测定步骤（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）：

试剂名称（μL）	对照管	测定管
样本	180	180
试剂一	300	220
试剂二		80

37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴，准确反应时间10min

试剂三	400	400
试剂四	400	400

混匀， 100℃煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），冷却后，对照管调零，测定550nm处测定管吸光值。

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