海藻糖含量检测试剂盒

标题：海藻糖含量检测试剂盒

产品概述

海藻糖含量检测试剂盒

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿﹑研钵、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体 50ml×1瓶，4℃保存；

试剂一：粉剂×5瓶，4℃保存；

工作液的配制：临用前在每瓶试剂一中加入1.5mL蒸馏水后，缓慢加入8.5mL浓硫酸，不断搅拌，充分溶解，待用。

海藻糖提取：

1、细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每200万细菌或细胞加入400μL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3s，间隔10s，重复30次），室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清。

2、组织的处理：称取约0.1g样本，常温研碎，加入1mL提取液，室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清。

3、血清（浆）的处理：吸取约100μL血清（浆），加入1mL提取液，室温静置45min，振荡3~5次，冷却后，8000g，常温离心10min，取上清。

测定操作表（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）：

混匀，100'C煮沸10 min（盖紧，防止水分散失），自然冷却至室温，在620 nm 波长下测定吸光度值。

注意：由于工作液具有强腐蚀性，请谨慎操作。

海藻糖含量计算：

标准条件下测定的回归方程为y = 8.8976x +0.0729；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。

1、细菌、细胞或组织海藻糖含量计算

（1）：海藻糖含量（mg/mg prot ）＝（A测定管-0.0729）÷8.8976 ÷蛋白浓度mg/mL。

（2）：海藻糖含量（mg/g 鲜重）＝（A测定管-0.0729）÷8.8976 ÷样品鲜重g/mL。

2、血清（浆）海藻糖含量计算

海藻糖含量（mg/L）＝（A测定管-0.0729）÷88.976 

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