β-淀粉酶检测试剂盒

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测定原理：

还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质。α-淀粉酶不耐酸，β-淀粉酶不耐热。根据上述特性，钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、恒温水浴锅、离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：50mL×1瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需加热溶解后再用；

试剂二：40mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

称取约0.1g样本，加入0.8mL蒸馏水，研磨匀浆；将匀浆倒入离心管中，提取液在室温下放置提取15min，每5min振荡1次，使其充分提取；3000g，常温离心10min，取上清液加蒸馏水定容至10 mL，摇匀，即淀粉酶原液。

吸取上述淀粉酶原液1mL，加入4mL双蒸水，摇匀，即为淀粉酶稀释液，用于（α＋β）淀粉酶总活力的测定。

测定步骤和操作表：

70℃水浴15min左右，冷却

将以上对照管、测定管和试剂二置于40℃恒温水浴中保温10min左右

在40℃恒温水浴中准确保温5min

混匀，室温静置10min，在540nm下测定吸光度，从左到右分别记为A1、A2、A3和A4。

β-淀粉酶检测试剂盒