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标题:α-淀粉酶检测试剂盒
产品概述
α-淀粉酶检测试剂盒
测定意义:
淀粉酶负责水解淀粉,包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键,生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖,同时使淀粉的粘度降低,因此又称为液化酶。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:25mL×1瓶,常温保存,若有黄色晶体析出,需加热溶解后再用;
试剂二:20mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
称取约0.1g样本,加0.8mL蒸馏水匀浆;匀浆后在室温下放置提取15min,每隔5min振荡1次,使其充分提取;3000g,常温离心10min,吸取上清液并且加蒸馏水定容至10 mL,摇匀,即为淀粉酶原液。
操作步骤和加样表(在1.5mLEP管中依次加入下列试剂):
1、β-淀粉酶灭活:
试剂(μL) | 对照管 | 测定管 |
α‑淀粉酶原液 | 250 | 250 |
70℃水浴15min左右,冷却
2、加入试剂一并且保温:
试剂一 | 500 |
|
将以上对照管、测定管和试剂二置于40℃恒温水浴中保温10min左右
3、准确反应5min
试剂二 | 250 | 250 |
在40℃恒温水浴中准确保温5min
4、加入试剂一,并且混匀
试剂一 |
| 500 |
混匀,室温静置10min,蒸馏水调零,540nm处读取对照管和测定管吸光度,分别记为A1和A2。
α-淀粉酶检测试剂盒
025-65010873
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