α-淀粉酶检测试剂盒

α-淀粉酶检测试剂盒

测定意义：

淀粉酶负责水解淀粉，包括α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

试剂一：25mL×1瓶，常温保存，若有黄色晶体析出，需加热溶解后再用；

试剂二：20mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

称取约0.1g样本，加0.8mL蒸馏水匀浆；匀浆后在室温下放置提取15min，每隔5min振荡1次，使其充分提取；3000g，常温离心10min，吸取上清液并且加蒸馏水定容至10 mL，摇匀，即为淀粉酶原液。

操作步骤和加样表（在1.5mLEP管中依次加入下列试剂）：

1、β-淀粉酶灭活：

70℃水浴15min左右，冷却

2、加入试剂一并且保温：

将以上对照管、测定管和试剂二置于40℃恒温水浴中保温10min左右

3、准确反应5min

在40℃恒温水浴中准确保温5min

4、加入试剂一，并且混匀

混匀，室温静置10min，蒸馏水调零，540nm处读取对照管和测定管吸光度，分别记为A1和A2。

α-淀粉酶检测试剂盒