更新时间:2019-11-07
测定意义:NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。NO含量检测试剂盒
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测定原理:
NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体3mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体3mL×1瓶,4℃保存。
样品处理:
测定步骤和操作表:
| 对照管 | 测定管 |
样品(μL) | 100 | 100 |
试剂一(μL) |
| 50 |
试剂二(μL) | 50 | 50 |
试剂三(μL) | 50 |
|
混匀,室温静置15min,微量石英比色皿/96孔板,测定550nm处吸光值,记为A550。 |
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