组织无机磷含量检测试剂盒

组织无机磷含量检测试剂盒

实验中所需仪器及设备：

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配置：

试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入20 mL蒸馏水，充分溶解后加入试剂二（全部），混匀。

标准品：液体×1支，2 μ mol/L无机磷标准液，4℃保存。

无机磷提取：

  称取约0.1g组织，加试剂一1.0 mL冰上充分匀浆，4℃，10000rpm，离心10min，取上清液，待测。

无机磷磷含量测定操作：

1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。

2.打开水浴锅，调节温度到40℃。

3. 空白管：取EP管，依次加入500μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A空白管。

4. 标准管：取EP管，依次加入50μL标准液，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A标准管。

5. 测定管：取EP管，依次加入50μL上清液，450μL蒸馏水，500μL试剂三，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度，记为A测定管。

需在40min内完成比色。

注意事项：

1、试剂三需临用前配制，限当天使用。

2、测定前先用1~2个样品做预实验，如吸光值很高，需用蒸馏水做相应稀释。

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