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标题:中性木聚糖酶检测试剂盒
产品概述
中性木聚糖酶检测试剂盒
测定意义
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,NEX一般分离自适生长pH为6-8的微生物。
测定原理
NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算NEX活力。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、恒温水浴锅,可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
缓冲液:液体65mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体15mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶提取
测定操作表
| 对照管 | 测定管 |
样品(μL) | 200 | 200 |
缓冲液(μL) | 300 | 300 |
试剂一(μL) |
| 200 |
试剂二(μL) | 300 |
|
混匀,盖紧瓶盖,50℃水浴,反应30min,立即沸水浴10min灭活。(注意不要让盖子爆开,以免进水,改变了反应体系) | ||
试剂一(μL) | 200 |
|
试剂二(μL) |
| 300 |
混匀,沸水浴显色5min(注意不要让盖子爆开,以免进水改变了反应体系),1mL玻璃比色皿,对照管调零,测定A540。 |
注意事项
1. 吸光度变化应该控制在0.01~0.8之间,否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变;也可以延长或者缩短反应时间。
2. 试剂盒2-8℃保存,保质期3个月,建议尽快使用。
中性木聚糖酶检测试剂盒
025-65010873
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