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标题：蔗糖磷酸化酶检测试剂盒
产品概述
蔗糖磷酸化酶检测试剂盒
测定原理
SP能够以磷酸为受体，催化蔗糖产生1-磷酸葡萄糖，在葡萄糖磷酸变位酶催化下变位为6-磷酸葡萄糖，在6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下还原NADP+生成NADPH，导致340nm光吸收值增加。测定340nm吸光度增加速率，即可计算SP活性。
自备实验用品及仪器
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。
缓冲液：液体40mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体2mL×1支，4℃保存。
试剂三：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂四：粉剂1瓶，-20℃避光保存，临用前加5mL双蒸水溶解。
试剂五：粉剂1瓶，-20℃避光保存，临用前加5mL双蒸水溶解。
试剂六：粉剂1瓶，-20℃避光保存，临用前加10mL双蒸水溶解。
试剂七：粉剂1瓶，-20℃避光保存，临用前加10mL双蒸水溶解。
粗酶液提取
发酵液4℃，10000rpm，离心15min，取菌泥约0.5g，加入1mL提取液，用超声波进行破碎，功率为300w，破碎3s，间歇5s，总时间为3min，然后4℃，12000rpm，离心10min，取20μL测定蛋白含量，其余的作为待测样本。
测定操作表
| 对照管 | 测定管 |
缓冲液（μL） | 850 | 650 |
试剂一（μL） | 500 | 500 |
试剂二（μL） | 30 | 30 |
试剂三（μL） | 20 | 20 |
试剂四（μL） | 100 | 100 |
试剂五（μL） | 100 | 100 |
试剂六（μL） | 200 | 200 |
试剂七（μL） | 200 | 200 |
混匀，37℃水浴预热5min | ||
样本（μL） |
| 200 |
迅速混匀，于1mL石英比色皿，对照管调零，测定340nm的初始值A1，测定完立即放入37℃水浴准确反应2min，迅速测定340nm吸光值A2，△A= A2- A1。 | ||
注意事项
蔗糖磷酸化酶检测试剂盒
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025-65010873
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