更新时间:2019-11-07
测定意义:蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。测定原理:本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。蔗糖酶检测试剂盒
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蔗糖酶检测试剂盒
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶 ,4℃保存,用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解,现配先用;
试剂三:液体5mL×1瓶,常温保存;
样品测定的准备:
称取约0.1g组织加入1mL提取液,冰浴中匀浆。8000g ,4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
加样表和测定步骤:
试剂名称(μL) | 对照管 | 测定管 |
试剂一 | 50 | 50 |
蒸馏水 | 100 |
|
样本 |
| 100 |
试剂二 | 50 | 50 |
置于25℃准确水浴10min
试剂三 | 100 | 100 |
混匀, 100℃水浴5min左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水 | 700 | 700 |
混匀,用对照管调零,测定520nm吸光值
蔗糖酶检测试剂盒