样本中，干扰物质如何消除呢？

  我们都知道，在实际检测过程中，试剂可能会受到各种干扰物质的影响，导致假阳性或假阴性结果。这些干扰物质可以分为内源性和外源性两类。内源性干扰物质通常是由于样品本身的特性或病理原因产生的，如异嗜性抗体、自身抗体、补体等；而外源性干扰物质则主要来自样品处理或检测过程中的外部因素，如脂血、溶血、黄疸等。本文将详细介绍免疫实验中常见的干扰物质及其干扰消除方法。

一、内源性干扰物质及其干扰消除方法：

1、异嗜性抗体（Heterophil antibody, HA）：异嗜性抗体是一类针对定义不明确的抗原产生的具有多重特异性的免疫球蛋白。它们通常显示弱亲和力，能与多种动物制成的生物制剂的抗体结合，从而干扰测定结果。它们可以导致假阳性或假阴性结果，特别是在HIV、AFP、CA125、PCT等检测中尤为常见。

为了消除异嗜性抗体的干扰，可以采用以下几种方法：

‌（1）使用与检测/捕获抗体亚型一致的动物Ig‌：这可以通过特异性结合来消除异嗜性抗体的干扰。

‌（2）‌使用阻断剂‌：阻断剂可以封闭异嗜性抗体的结合位点，从而减少其干扰。常用的阻断剂包括正常动物血清的混合物，这些混合物可以有效地吸收异嗜性抗体。

‌‌（3）样本稀释和连续稀释检测‌：将样本倍数稀释后再检测，若测值呈非线性，说明存在干扰物。这种方法可以帮助确认异嗜性抗体的存在。

2、自身抗体：自身抗体是针对自身抗原成分产生的一类抗体，它们可能与恶性疾病或自身免疫功能紊乱有关。如抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素、抗甲状腺激素抗体等，这些抗体能与相应靶抗原形成复合物，从而干扰测定结果。

消除自身抗体干扰的方法包括：

‌（1）‌使用理化方法将其解离后再测定‌：这可以通过改变样本的pH值、温度或添加特定的化学试剂来实现。

‌（2）‌使用阻断剂‌：阻断剂可以封闭自身抗体的结合位点，从而减少其干扰。例如，不同浓度的PEG可沉降不同分子量大小的蛋白，有助于消除自身抗体引起的干扰。

‌（3）‌更换原料抗体的种属‌：有时候，改变原料抗体的种属可以降低与自身抗体结合的可能性。

3、补体（Complement）：补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中。在免疫检测系统中，抗体固相包被或标记导致抗体分子发生变构，其Fc段的补体C1q分子结合位点暴露，C1q桥联导致假阳性结果。

为了消除补体的干扰，可以采用以下方法：

‌‌（1）使用EDTA处理样本‌：EDTA可以与补体结合，从而使其失去活性。通常使用终浓度为10～40 mmol/L的EDTA溶液处理样本。

‌‌（2）加热样本‌：将样本在53℃加热10分钟可以灭活补体C1q，从而减少其干扰。

二、外源性干扰物质及其干扰消除方法：

1、脂血：脂血是临床检验中一种常见的干扰检测的样本性状。发生脂浊的血清样本中含有大量的乳糜微粒和极低密度脂蛋白，这些物质具有光散射的特性，会产生浊度，从而影响反应的吸光度值或使产物的颜色发生变化。

消除脂血干扰的方法包括：

2、样本稀释‌：使用0.9%氯化钠溶液稀释法可以去除乳糜，减少干扰。

‌3、使用离心分离技术‌：通过离心分离去除样本中的乳糜微粒和极低密度脂蛋白。

4、溶血：溶血时，红细胞破裂会释放出血红蛋白、胰岛素降解酶、铁蛋白等物质，这些物质会干扰测定结果。

消除溶血干扰的方法包括：

‌‌（1）‌设置适当的副波长‌：通过调整检测波长来减少血红蛋白等物质的干扰。

‌‌（2）‌使用Hb单克隆抗体处理样本‌：Hb单克隆抗体可以特异性地结合血红蛋白，从而减少其干扰。

‌‌（3）黄疸：黄疸时，胆-红-素水平升高，胆红素通过本底干扰、光谱干扰影响测定结果。

5、消除黄疸干扰的方法包括：

（1）‌设置合适的副波长‌：通过调整检测波长来减少胆红素的干扰。

（2）‌样本预稀释‌：通过稀释样本来降低胆红素的浓度，从而减少其干扰。

三、其他干扰消除方法：

除了针对特定干扰物质的消除方法外，还有一些通用的干扰消除方法可以在实验试剂的研制和应用中使用：

‌1、使用免疫阻断剂‌：免疫阻断剂可以用来封闭或清除样本中潜在的干扰物质。阻断剂分为被动阻断剂和主动阻断剂。主动阻断剂可以特异、主动、高效地中和干扰抗体，从而消除其干扰。

2、优化反应条件‌：通过调整酸碱度、离子强度、温度、抗原抗体比例、反应时间等条件来优化免疫反应，减少干扰物质的影响。

‌3、改进检测方法‌：采用更灵敏、更特异的检测方法可以减少干扰物质的影响。例如，使用纳米颗粒标记的免疫检测方法可以提高检测的灵敏度和特异性。

最后，我们在实际应用中，应根据样本特性和检测要求选择合适的干扰消除方法，以确保检测结果的准确性。