脯氨酸（PRO）含量试剂盒

标题：脯氨酸（PRO）含量试剂盒

产品概述

脯氨酸(PRO)含量试剂盒

测定意义：

Pro广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、冰乙酸25mL、甲苯50mL、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：

提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：冰乙酸25 mL×1瓶， 4℃保存。（自备）

试剂二：液体25 mL×1瓶， 4℃保存。

试剂三：甲苯50mL×1瓶，4℃保存。（自备）

样品测定的准备：

1、细胞、细菌或组织样品的制备 ：

细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20％，超声3秒，间隔10秒，重复30次），之后置沸水浴振荡提取10min；10000g，常温离心10min，取上清，冷却后待测。

组织：称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆；之后置沸水浴振荡提取10min，10000g，常温离心10min，取上清，冷却后待测。

2、血清（浆）样品：取100μL血清（浆）加入1mL提取液，充分混匀，之后置沸水浴振荡提取10分钟，10000g，常温离心10分钟，取上清，冷却后待测。

测定步骤：

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。
2. 样本测定：

(1) 取0.25mL上清液+0.25mL试剂一+0.25mL试剂二 于2mL有盖EP管中，置沸水浴中保温30min（盖紧，防止水分散失），每10min振荡一次。

(2) 待冷却后，加入0.5mL试剂三，振荡30s，静置片刻，使色素转至试剂三中；吸取0.2mL上层溶液于微量石英比色皿或96孔板中，于520nm波长处比色，记录吸光值A。

脯氨酸(PRO)含量试剂盒