更新时间：2019-11-07
测定意义：LOX广泛存在于植物组织中，催化不饱和脂肪酸氧化反应，导致膜脂过氧化。在植物的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。测定原理：LOX催化亚油酸氧化，氧化产物在234nm处有特征吸收峰；测定234nm吸光度增加速率，来计算LOX活性。植物中脂氧合酶（LOX）检测试剂盒
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植物中脂氧合酶(LOX)检测试剂盒
自备仪器和用品：
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2mL试剂二，充分溶解。
粗酶液提取：
称取约0.1g样品，加试剂一1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。
测定：
1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到234 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中预热30 min以上。
3. 空白管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸馏水、160μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于234nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A1和A2。
4. 测定管：依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、160μL试剂二和20μL试剂三，迅速混匀后于234nm比色，记录15s和75s的吸光值，分别记为A3和A4。
注意事项：
1．试剂三易自发氧化，从而导致空白管测定值偏高，必须临用前配制。
2．样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日完成酶活性测定。
植物中脂氧合酶(LOX)检测试剂盒
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