氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒

标题：氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒

产品概述

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒

自备仪器和用品：

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

试剂组成和配置：

试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1支，4℃保存。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水溶解，4℃保存。

试剂五：液体×1瓶，-20℃保存。临用前加入0.2mL蒸馏水稀释，4℃保存。

标准液：液体×1瓶，1μmol/mL GSSG，4℃保存。

粗酶液提取：

称取约0.1g样品，加1 mL试剂一，冰上充分研磨，8000rpm 4℃离心10min，取上清液（如上清不清澈，再离心3min）100μL，加900μL的蒸馏水混匀待测。

GSSG含量测定：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到412nm，蒸馏水调零。

2. 试剂三置于25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）水浴中保温30min。

3. 标准管：取0.5mL EP管，加入20μL标准液，1μL试剂二，盖紧后混匀，置于37℃水浴30min；开盖后依次加入140μL试剂三，40μL试剂四，2μL试剂五，迅速混匀后，测定30s和150s光吸收A1和A2。

4. 测定管：取0.5mL EP管，加入20μ上清液，1μL试剂二，盖紧后混匀，置于37℃水浴30min；开盖后依次加入140μL试剂三，40μL试剂四，2μL试剂五，迅速混匀后，测定30s和150s光吸收A3和A4。

注意事项：

因为提取过程中去掉蛋白质，所以提取液不能用于测定蛋白含量。

氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测试剂盒