更新时间:2019-11-07
测定意义:血钙几乎全部存在于血浆中,所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式,其中只有离子钙直接起生理作用,它与结合钙处于动态平衡,并受血液pH的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关,过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。血钙浓度检测试剂盒
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血钙浓度检测试剂盒
测定原理:
在强碱溶液中游离钙与GBHA反应生成红色钙-GBHA复合物,在520nm有吸收峰;通过测定520nm吸光度,计算游离钙浓度。
自备仪器和用品:
可调式移液枪、可见分光光度计/、石英比色皿/96孔板、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。
试剂组成和配置:
试剂一:液体×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体×1瓶(空瓶,试剂自备)。取10 mL试剂瓶。依次加入9 mL无水甲醇和1 mL丙酮,盖紧混匀即可。
标准液:液体×1瓶,0.3μmol/mL,4℃保存。
血钙浓度测定操作:
1. 分光光度计预热30min以上,调节波长到520nm,蒸馏水调零。
2. 空白管:取石英比色皿/96孔板,依次加入蒸馏水12 μL,试剂一50μL,混匀;再加入试剂二50μL,混匀;后加入试剂三100μL,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度A空白管。做一个空白管即可。
3. 标准管:取石英比色皿/96孔板,依次加入标准液12μL,试剂一50 μL,混匀;再加入试剂二50μL,混匀;后加入试剂三100μL,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度A标准管。做一个标准管即可。
4. 测定管:取石英比色皿/96孔板,依次加入血液样品12μL,试剂一50 μL,混匀;再加入试剂二50μL,混匀;后加入试剂三100μL,混匀;静置5min后于520 nm测定吸光度A测定管。记为A测定管。
注意:加试剂三后,应该在30 min内完成该管的测定。
血钙浓度计算:
血钙含量(μmol /dL)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V样品总
=30×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:0.3μmol/mL; V样总:样品总体积,1 dL=100 mL。
注意事项:
宜早晨空腹采血,并且采血后应该尽快完成测定。
血钙浓度检测试剂盒