酰基转移酶（AAT）检测试剂盒

标题：酰基转移酶（AAT）检测试剂盒

产品概述

酰基转移酶(AAT)检测试剂盒

测定原理：

AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇，同时还原DTNB生成TNB；TNB在412nm有吸收峰，测定412nm吸光度增加速率，来计算AAT活性。

自备仪器和用品：

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体100 mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体25 mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1管，-20℃保存。临用前加蒸馏水1mL充分溶解，4℃保存。

试剂四：液体2 mL×1管，4℃保存。

试剂五：粉剂×1管，4℃避光保存。临用前加入试剂二1mL充分溶解，4℃避光保存。

粗酶液提取：

称取约0.1g样品，加试剂一1mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。

AAT测定操作：

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到412 nm，蒸馏水调零；水浴锅35℃预热。

2. 对照管：依次在500μL EP管中依次加入140μL试剂二、10μL试剂三、20μL试剂四和10μL试剂五，20μL待测液，室温放置10min后于412nm测定吸光度，记为A1。

3. 测定管：依次在500μL EP管中依次加入140μL试剂二、10μL试剂三、20μL试剂四和20μL待测液，35℃水浴15min，加10μL试剂五，室温放置10min后于412nm测定吸光度，记为A2。△A测=A2-A1。

酰基转移酶(AAT)检测试剂盒