脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）活性检测试剂盒

标题：脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）活性检测试剂盒

产品概述

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒

测定原理：

DHAR催化GSH还原DHA生成AsA，通过测定DHA减少速率，计算DHAR活性。

实验中所需仪器及设备：

研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体50 mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体35 mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1瓶（棕色），4℃保存。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解。

试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解。

粗酶液提取：

称取约0.1g样品，加试剂一1 mL，冰上充分研磨，16000g 4℃离心20min，取上清液待测。

DHAR测定操作：

1. 分光光度计预热30 min，调节波长到265nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min以上。

3. 空白管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸馏水、20μL试剂三、20μL试剂四和140μL 试剂二，迅速混匀后于265nm比色，记录30s和150s的吸光值。

4. 测定管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、20μL试剂三、20μL试剂四和140μL 试剂二，迅速混匀后于265nm比色，记录30s和150s的吸光值。

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂盒