γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）活性检测试剂盒

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性检测试剂盒

测定意义：

γ-GT是γ-谷氨酰循环中的关键酶，催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基转移到受体。也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解，产生谷氨酸盐，在细胞外谷胱甘肽新陈代谢中起了重要的作用。

自备仪器和用品：

低温离心机、水浴锅、可调节移液器、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：液体×1瓶，4℃保存。

工作液（在试剂二瓶中配制）：临用前配制，把试剂三倒入试剂二瓶中，充分溶解（室温过低时可以40℃水浴促进溶解）；然后把试剂四倒入试剂二瓶中，混匀后室温保存。

粗酶液提取：

称取约0.1g样品，加试剂一1 mL充分研磨，于4℃，10000rpm离心15min，取上清液待测。

γ-GT测定操作

1. 分光光度计预热30min以上，调节波长到405 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂二置于25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）水浴中预热30min以上（保证无沉淀）。

3. 测定管：取微量玻璃比色皿或96孔板，依次加入20μL上清液，180μL工作液，混匀后于405nm测定10s和70s时吸光度，记为A1和A2。

回归方程：

分别配制浓度为0、20、40、60、80、100μmol/L的对硝基苯胺溶液，于405nm比色，记录其吸光值，绘制标准曲线，计算得标准曲线公式为：y=0.006x+0.0016，x为对硝基苯胺浓度，y为吸光值，R²=0.999。

γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性检测试剂盒