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产品推荐-植物超氧阴离子染色液(NBT法)

更新时间:2022-11-17      浏览次数:144

产品推荐-植物超氧阴离子染色液(NBT法)


产品简介

植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS活性非常大且极其不稳定,因此ROS的检测通常因其最终产物而定。超氧阴离子是活性氧的一种,属于一种含氧自由基,能将NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色甲瓒化合物,从而定位组织中的超氧阴离子。根据基本原理也称其为NBT法。本产品就是基于以上原理,用于植物活组织中的超氧阴离子染色。一般应植物超氧阴离子染色液(NBT法)用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后有超氧阴离子聚集的部位呈蓝色至深蓝色


植物超氧阴离子染色液(NBT法)-20221116.jpg


使用方法

1. 试剂准备:将50 mg NBT以Tris缓冲液(pH 7.4) 100 mL充分溶解,得到NBT染色工作液,避光4℃保存,一周内有效。

2. 采集植物幼苗或根尖,纯水稍洗净,滤纸上吸干多余水分。将植物幼苗或根尖浸入NBT染色工作液中,常温避光浸染2-6 h,至阳性部位出现深蓝色,其余部位为淡蓝色或近无色或呈植物本身的颜色即可(根据植物幼嫩程度。显色程度调整染色时间)。

3. 用镊子将植物幼苗或者叶片小心取出,纯水漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入95%乙醇中40℃处理3-16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素或者淡蓝色背景,处理期间可多次更换新鲜的95%乙醇。

4. 用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入纯水中来回漂洗3-5次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量NBT样本保存液中浸泡30 min后,随后可取出拍照。样本可置于该溶液中常温保存一周。


注意事项

1. NBT染色工作液配制好以后需4℃避光保存,一周内使用。存放时间过久,会影响显色。

2. 因任何外在因素都可能刺激植物应激产生超氧阴离子,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。

3. 样本染色完成后尽快拍照保存结果。

4. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。


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    025-65010873

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