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植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)

描述:产品名称 :植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)
产品货号 :YXWZ5019
产品规格 :3*100ml
储存条件:具体以标签为准
有效期:12个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-02-18
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产品详情/ PRODUCT DETAIL

标题:植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)

产品概述

产品名称 植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)

产品货号 YXWZ5019

产品规格 3*100ml             

储存条件具体以标签为准

有效期12个月                    

背景介绍

植物组织在胁迫环境条件下会产生多种活性氧(ROS),ROS 活性非常大且极其不 稳定,因此 ROS 的检测通常因其最终产物而定。超氧阴离子是活性氧的一种,属于一种含 氧自由基,能将 NBT(氮蓝四唑)还原成不溶于水的蓝色甲瓒化合物,从而定位组织中的 超氧阴离子。

植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)根据上述基本原理也称为 NBT 染色法,

用于植物活组织中的超氧阴离子染色。一般应用于较嫩的根尖、叶片等的整体染色,染色后 有超氧阴离子聚集的部位呈蓝色至深蓝色。该产品仅用于科研领域,不用于临床诊断或其他用途。

image.png产品组成:

 

 

 

 

 

 



自备材料: 

1、新鲜的植物叶片或根、自来水、蒸馏水、95%乙醇

2、超声波、磁力搅拌器、电子天平、滤纸、照相机

操作步骤(仅供参考)

1、试剂准备:将 50 mg NBT 加入到 100mL 磷酸缓冲液(pH 7.4) 中充分溶解,即得 NBT染色工作液,2-8 ℃避光保存,一月内有效。注:如果较难溶解,可通过超声、磁力搅拌等方法促溶。

2、样本准备:采集经胁迫(例如重金属)的采集植物幼苗或根尖,自来水稍洗净,置于滤纸上吸干多余水分。

3、染色:将植物幼苗或根尖浸入 NBT 染色工作液中,常温避光浸染 2~6 h,至阳性部位出现深蓝色,其余部位为淡蓝色或近无色或呈植物本身的颜色即可。(根据植物幼嫩程度。显色程度调整染色时间)

4、脱色:用镊子将植物幼苗或者叶片小心取出,浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次,置于滤纸上吸干多余水分后,浸入 95%乙醇中 40℃处理 3~16 h,目的是脱去植株幼苗或者叶片本身的叶绿素或者淡蓝色背景,处理期间可多次更换新鲜的 95%乙醇。

5、观察:用镊子取出植株幼苗或者叶片,浸入蒸馏水中来回漂洗 3~5 次,置于滤纸上吸干多余水分后,将样本转入适量 NBT 样本保存液中浸泡 30 min 后,随后可取出拍照。样本可置于该溶液中常温保存一周。

注意事项:

1、NBT 染色工作液配制好以后需2-8℃避光保存,一月内使用。存放时间过久,会影响显色。

2、因任何外在因素都可能刺激植物应激产生超氧阴离子,因此植物样本需要新鲜采集,并尽快完成染色。建议做阴性及阳性空白对照组。

3、样本染色完成后尽快拍照保存结果。

4、染色和脱色步骤也可参考如下建议操作:组织放入染液中,抽真空,-0.1MPa 保持负压20~30min,再于室温下静置染色 60min,弃染色液;加入 95%乙醇,于 70~80℃水浴锅脱色,每隔 10min 换一次 95%乙醇,待样品绿色全部褪去后可停止脱色。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

植物超氧阴离子染色液(NBT,pH7.4)

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