HRP标记的兔抗人IgM

描述：单体IgM在B细胞表面表达为膜结合抗体，在浆细胞分泌时表达为五聚体。由于它的高效价，IgM比其他同种型更有效地结合抗原和重复表位（病毒颗粒和红细胞），并且比IgG更有效地激活补体途径。mu恒定区的基因包含四个由短插入序列分隔的结构域。HRP标记的兔抗人IgM

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产品详情/ PRODUCT DETAIL

标题：HRP标记的兔抗人IgM

产品概述

HRP标记的兔抗人IgM

重要提示：

本产品仅用于研究用途，不用于人类、治疗或诊断应用。

抗体来源	Rabbit
克隆类型	Polyclonal
交叉反应
产品应用	WB=1:1000-10000 ELISA=1:1000-10000 IHC-P=1:100-1000 IHC-F=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分子量	900kDa
性状	Lyophilized or Liquid
浓度	2mg/1ml
免疫原	Full length plasma protein:
亚型	IgG
纯化方法	affinity purified by Protein A
储存液	0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件	Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

HRP标记的兔抗人IgM

一、戊二醛二步HRP标记法

1. 原理

戊二醛为一种双功能试剂，通过其醛基分别与酶和免疫球蛋白上的氨基共价结合，形成酶-戊二醛-免疫球蛋白结合物。

2. 标记步骤

（1）称取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中，于室温静置过夜。

（2）反应后的酶溶液经Sephadex G-25层析柱，用生理盐水洗脱。流速控制在1ml/1分钟，收集棕色流出液。如体积大于5ml，则以PEG浓缩至5ml。放置25ml小烧杯中，缓慢搅拌。

（3）将待标记的抗体12.5mg用生理盐水稀释至5ml，搅拌下逐滴加入酶溶液中。

（4）用1M PH9.5碳酸缓冲液0.25ml，继续搅拌3小时。

（5）加0.2M赖氨酸0.25ml，混匀后，置室温2小时。

（6）在搅拌下逐滴加入等体积饱和硫酸铵，置4℃ 1小时。

（7）3000rpm离心半小时，弃上清。沉淀物用半饱和硫酸铵洗二次，zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。

（8）将上述溶液装入透析袋中，对0.15M PH7.4的PBS缓冲盐水透析，去除铵离子后(用萘氏试剂检测)，10,000rpm离心30分钟去除沉淀，上清液即为酶结合物，分装后，冰冻保存。

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