甘油三酯检测服务

甘油三酯含量测定试剂盒说明书
规格：100管/96样 微量法

注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：
TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。

测定原理：用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过点酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在420nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。

自备实验用品及仪器：可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水

试剂组成和配置：试剂一：液体60mL×2瓶，4℃保存。
                试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
                 试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存。
                 试剂四：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。
                试剂五：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
                试剂六：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。
                标准品：液体1mL×1支，1mg/mL标准甘油三酯溶液，4℃避光保存。
TG的提取：
1、组织中TG的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即TG待测液。
2、细胞、细菌中TG的提取：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），8000g，4℃离心10min，取上清，即TG待测液。
3、血清（浆）样品：直接测定。

测定操作：
1.可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到420nm，蒸馏水调零。
           2．水浴锅预热到65℃。
            3．甘油三酯含量测定：

待冷却后，置于微量石英比色皿/96孔板测定420nm处吸光值，记为A空，A标和A测。
注意：空白管和标准管只需测定一次。