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脂肪酸合成酶(FAS)检测试剂盒

描述:测定意义:
FAS是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶A和丙二酰辅酶A而生成长链脂肪酸。FAS普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成长链脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+没有;通过测定340nm 光吸收下降速率,计算FAS活性。
脂肪酸合成酶(FAS)检测试剂盒

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2019-11-07
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产品详情/ PRODUCT DETAIL

标题:脂肪酸合成酶(FAS)检测试剂盒

产品概述

脂肪酸合成酶(FAS)检测试剂盒

自备仪器和用品:

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液枪和蒸馏水。

试剂组成和配制:

试剂一:液体×1瓶,-20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解冻后混匀。

试剂二:粉剂×1瓶。临用前加入440μL试剂四,充分溶解。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入440μL试剂四,充分溶解。

试剂四:液体×1, 4℃保存。

试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加入840μL试剂四,充分溶解。

粗酶液提取:

称取约0.1g样品,加试剂一1 mL充分研磨,16000rpm 4℃离心40min,取上清液,待测。

FAS测定操作:

1. 分光光度计预热30min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。

2. 试剂四置于40℃水浴中预热30 min以上。

3. 空白管:500μL EP管中依次加入20μL蒸馏水、4μL试剂二、4μL试剂三、164μL试剂四和8μL试剂五,迅速混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s90s时吸光值,分别记录为A1A2△A=A1-A2

4. 测定管:500μL EP管中依次加入20μL上清液、4μL试剂二、4μL试剂三、164μL试剂四和8μL试剂五,迅速混匀后于340nm处测定吸光值,记录第30s90s时吸光值,分别记录为A1A2△A=A3-A4

注意事项:

上清液蛋白质浓度需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。

脂肪酸合成酶(FAS)检测试剂盒

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