更新时间:2019-11-07
测定意义:血清总铁结合能力指血清转铁蛋白可结合铁的能力,其含量高低与缺铁性贫血、急性肝炎等疾病的发生密切相关。血清总铁结合能力检测试剂盒
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血清总铁结合能力检测试剂盒
测定原理:
Fe2+与菲洛嗪反应形成紫红色化合物,在562nm处有特征吸收峰。碱性条件下,血清转铁蛋白可以与Fe3+结合,剩余未结合的Fe3+可以被还原成Fe2+,此时吸光度A1与未结合Fe3+数量正相关;酸化后,转铁蛋白结合的Fe3+释放,并且进一步被还原成Fe2+ ,此时吸光度A2与总Fe3+数量正相关。A2减A1与TIBC浓度呈正比。
自备实验用品及仪器:
天平、可见分光光度计/、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体30mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体5mL×1瓶,4℃避光保存。(临用前根据用量将A液和B液按1:1混合)
试剂四:液体7mL×1瓶,4℃保存。
测定操作表:
2、操作表
| 对照管 | 测定管 |
血清(μL) |
| 40 |
试剂一(μL) | 320 | 280 |
试剂二(μL) | 40 | 40 |
混匀,37℃,10min | ||
试剂三(μL) | 40 | 40 |
混匀,37℃,5min,对照管调零,取200μL于微量石英比色皿/96孔板测定562nm处吸光值A1,剩余200μL立即加入试剂四 | ||
试剂四(μL) | 60 | 60 |
混匀,37℃,5min,对照管调零,取200μL于微量石英比色皿/96孔板测定562nm处吸光值A2。ΔA=A2-A1。 |
注意事项:
血清总铁结合能力检测试剂盒