土壤中性磷酸酶（S-NP）检测试剂盒

标题：土壤中性磷酸酶（S-NP）检测试剂盒

产品概述

土壤中性磷酸酶(S-NP)检测试剂盒

测定意义：

土壤磷酸酶是催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的显著影响，根据适PH范围，一般把土壤磷酸酶分为中性、酸性和碱性三种类型。

测定原理：

中性环境中，S-NP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出NP活性。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、37℃恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、乙醇和甲苯。

试剂组成和配制：

试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体×1瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加1152μL无水乙醇（自备），48 μL蒸馏水充分溶解。（变褐色后不能再使用）

标准品：液体×1瓶，2 μmol/mL酚标准液，4℃保存。

催化反应：

称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4 mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。10000rpm室温离心10min，取上清液置于冰上待测。

显色反应：

1. 分光光度计预热30 min以上，调节波长到660 nm，蒸馏水调零。

2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸馏水，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A空白管。

3. 标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL标准液，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A标准管。

4. 测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL试剂三，20 μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830 μL，混匀后室温静置30 min，于660 nm测定吸光度，记为A测定管。

土壤中性磷酸酶(S-NP)检测试剂盒