更新时间：2019-11-07
测定意义：H2S是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。测定原理：H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在665nm处有大吸收峰，通过测定其吸光值可计算H2S含量。H2S含量检测试剂盒
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H2S含量检测试剂盒
自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体8mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂四：液体8mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：液体1.5mL×1管，4℃避光保存。
样品处理：
操作表：
| 空白管 | 测定管 |
样品（μL） |
| 75 |
H2O（μL） | 75 |
|
试剂一（μL） | 75 | 75 |
充分震荡混匀 | ||
试剂二（μL） | 75 | 75 |
12000rpm，4℃，离心10min，去上清，留沉淀 | ||
H2O（μL） | 150 | 150 |
12000rpm，4℃，离心10min，去上清，留沉淀 | ||
试剂一（μL） | 75 | 75 |
试剂三（μL） | 75 | 75 |
充分震荡混匀 | ||
试剂四（μL） | 75 | 75 |
12000rpm，4℃，离心10min，取上清 | ||
试剂五（μL） | 15 | 15 |
室温静置20min，空白管调零，微量石英比色皿/96孔板，测定665纳米吸光值，记为A665。 | ||
H2S含量计算：
标准曲线回归方程为：y = 0.0044x，R2 = 0.9988
H2S含量（μmol/g 鲜重）= A665÷0.0044×稀释倍数×1000÷W=7.27×105×A665÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
H2S含量（μmol/mg prot）= A665÷0.0044×稀释倍数×1000÷Cpr=7.27×105×A665÷Cpr
（2）液体样品H2S（μmol/L）= A665÷0.0044×稀释倍数=727×A665
稀释倍数：（75μL+75μL+75μL）÷75μL=3.2；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；1000：1mmol/mL=1000μmol/mL；
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为：y = 0.0022x，R2 = 0.9988
H2S含量（μmol/g 鲜重）= A665÷0.0022×稀释倍数×1000÷W=1.454×106×A665÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
H2S含量（μmol/mg prot）= A665÷0.0022×稀释倍数×1000÷Cpr=1.454×106×A665÷Cpr
（2）液体样品H2S（μmol/L）= A665÷0.0022×稀释倍数=1454×A665
稀释倍数：（75μL+75μL+75μL）÷75μL=3.2；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量，g；1000：1mmol/mL=1000μmol/mL；
H2S含量检测试剂盒
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