western转移缓冲液（尼龙膜）

标题：western转移缓冲液（尼龙膜）

产品概述

产品名称： western转移缓冲液(尼龙膜)
规格：500ml
用途：蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,适用于蛋白质转移到尼龙膜,不适用于PVDF膜和NC膜
注意事项：主要由Tris、甘氨酸组成。
储存条件：室温,12个月
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为蛋白质结构与功能研究， 需将蛋白质分离、 纯化， 从而提高其比活。 分离蛋白质一般
用等电点沉淀、 盐析和有机溶剂分级分离。 而纯化则常用层析法、 分子筛和离子交换法。 可
能的话， 用亲和层析。 后提纯用电泳及等电点聚焦技术。
分离、 纯化方法基于：
1. 根据分子大小
（1） 透析和超过滤 利用蛋白质分子不能透过半透膜， 使蛋白质和其他小分子物质分开，
叫透析。 利用压力或离心力， 强使水和其他小分子溶质通过半透膜， 叫超过滤。
（2） 密度梯度离心 如果蛋白质颗粒在具有密度梯度的介质（常用蔗糖梯度） 中离心时，
质量和密度大的颗粒比质量和密度小的颗粒沉降快并且每种蛋白质颗粒沉降到与自身密度
相等的介质梯度时， 即停止不前， 后在各种离心管中被分离成各自独立的区带， 分部分收
集。
（3） 分子筛层析 也叫凝胶过滤。 它是根据分子大小分离蛋白质混合物的有效的方法
之一。当不同分子大小的蛋白质混合液通过装填有高度水化的惰性多聚体（常用葡聚糖凝胶）
和琼脂糖凝胶的层析柱时， 比凝胶“网眼” 大的蛋白质分子不能进入“网眼” 而被排阻在凝
胶颗粒之外， 后随洗脱剂流出。 比“网眼” 小的分子则进入凝胶颗粒的内部。
2. 利用溶解度差别
（1） 等电点沉淀和 pH 控制 当蛋白质混合物的 pH 被调到其中一种成分的等电点 pH 时，
则该蛋白质大部或全部将沉淀下来， 那些等电点高于或低于该 pH 的蛋白质仍留在溶液中。
这样沉淀出来的等电蛋白保持着天然构象， 能再溶解。
（2） 盐析 它是蛋白质制剂的分离和纯化过程中常用的方法之一。 常用高浓度中性盐，
如（NH 4 ） 2 SO 4 ， HgCl 2 等， 它们影响蛋白质溶解度的能力是它们离子强度的函数。 盐析法能
保持蛋白质的天然构象， 能再溶解。
（3） 有机溶剂分级分离 乙醇、 丙酮等有机溶剂能加强同一或相邻蛋白质分子中相反电
荷之间的吸引力， 使蛋白质分子趋于凝集、 沉淀。 操作须在低温下进行。 
western转移缓冲液(尼龙膜)
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