碱性磷酸酶（AP）标记的驴抗羊IgG 如果一抗自己带有可以被检测出的标记，则不需要二抗。但这样成本很高，因为一种一抗只识别一种底物。所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。预吸附处理可降低二抗与细胞和组织样品中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应的风险。

碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗兔IgG 二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记，作用是检测一抗。如果一抗来源于山羊，二抗必须选择抗山羊的抗体。

碱性磷酸酶（AP）标记的小鼠抗兔IgG 二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记（如带荧光、放射性、化学发光或显色基团），作用是检测一抗。二抗必须能识别一抗。如果一抗是小鼠单克隆抗体，分离类型是小鼠IgG1，那么二抗必须选择抗小鼠IgG的抗体；

碱性磷酸酶（AP）标记的驴抗兔IgG 二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记，作用是检测一抗。虽然可购买能识别所有亚类的一般的抗小鼠IgG二抗，但尽可能购买抗某一特定亚类的抗体以增加特异性。大多数物种的分离类型都是IgG，物种特异性抗IgG抗体能很好地工作。但注意鸟类或禽类的免疫球蛋白为IgY。

碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗小鼠IgG 二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记，作用是检测一抗.小鼠IgG抗体还可以分为各种亚类，如IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG2c，IgG3。

碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗小鼠IgG 二抗：可以和一抗结合，并带有可以被检测出的标记，作用是检测一抗。购买二抗时注意分别选择抗小鼠IgM和小鼠IgG的抗体。