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血液RNA提取试剂盒预防污染至关重要
核糖核酸(缩写为RNA,即Ribonucleic Acid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A(腺嘌呤)、G(鸟嘌呤)、C(胞嘧啶)、U(尿嘧啶),其中,U(尿嘧啶)取代了DNA中的T。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。
预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1.经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase污染。
2.使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3.RNA 在Buffer PR中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在1500C
4.烘烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水*清洗,再灭菌,即可去除RNase。
5.配制溶液应使用RNase-free ddH2O。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),混匀后放置过夜,高压灭菌)。
溶液的稀释准备:
使用前50T的规格加入52 ml ;100T加入104 ml 无水乙醇
Buffer R1(10X)需按1:9稀释。
Buffer R2使用前加入β-巯基乙醇,使终浓度为1%,如1ml Buffer R2加入10μl巯基乙醇。
可能出现的问题与对策:
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