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氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)

描述:产品名称 :氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)
货号 :YX2159
产品规格 :100T
储存条件 :4℃。避光
有效期 :6个月
本产品仅供科研实验用,不做其他用途。

  • 产品型号:
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-02-02
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产品详情/ PRODUCT DETAIL

标题:氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)

产品概述

产品名称 氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)

货号 YX2159

产品规格 100T                      

储存条件 4。避光                 

有效期 6个月                  

 

产品简介 

氨基酸(AA)检测试剂盒(茚三酮比色法)检测原理是在弱酸条件下,氨基酸与茚三酮共热情况下能定量的产生蓝紫色的二酮茚胺(又称Ruhemans紫),其吸收峰在波长570nm处,在一定范围内颜色深浅(即吸光度)与氨基酸浓度成正比,该试剂盒主要用于检测植物组织、血清、尿液、食品、药品等中的总游离氨基酸含量。

实验流程:

1、 准备样品

①植物样品:取新鲜植物组织,称取0.4g,按植物组织:AA Lysis buffer(1×)=0.4g:2.0ml的比例加入AA Lysis buffer(1×)匀浆或研磨,用无氨蒸馏水稀释至40ml,混匀,

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,

③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要用AA Lysis buffer(1×)进行匀浆,1000g离心5min,留取上清即为氨基酸粗提液

④高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的氨基酸,可以使用AA Lysis buffer(1×)进行恰当的稀释。

2、配制茚三酮显色液: 取0.3g茚三酮,溶解于50ml茚三酮稀释液,搅拌或超声处理至完-全溶解,即为茚三酮显色液。

3、配制茚三酮工作液: 取适量的茚三酮显色液、AA Assay buffer,按茚三酮显色液:AA Assay buffer=35:3的比例混合,即为茚三酮工作液

4、配制维生-素C工作液: 取出1支维生-素C,准确溶解于30ml无氨蒸馏水,混匀

5、配制系列氨基酸标准溶液:取出氨基酸标准(50μg/ml)恢复至室温,用无氨蒸馏水将其稀释至10μg/ml,然后按下表继续稀释:

加入物(ml)

1

2

3

4

5

氨基酸标准(10μg/ml)

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

无氨蒸馏水

0.4

0.3

0.2

0.1

0

氨基酸浓度(μg/ml)

2

4

6

8

10

6、AA加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入

加入物(ml)

空白管

标准管

测定管

无氨蒸馏水

0.30

系列氨基酸标准(1~5号管)

0.30

待测样品

0.30

茚三酮工作液

0.45

0.45

0.45

维生-素C工作液

0.15

0.15

0.15

混匀,80℃中加热20min,冰水迅速冷却。

 7、AA测定:加60%乙醇2.1ml,混匀;立即以空白调零,分光光度计(比色杯光径1cm)测定标准管、测定管570nm处吸光度(记为A标准、A测定)。


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