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标题：HRP标记的兔抗牛IgM
产品概述
HRP标记的兔抗牛IgM
本产品仅用于研究用途，不用于人类、治疗或诊断应用。
| 抗体来源 | Rabbit |
| 克隆类型 | Polyclonal |
| 交叉反应 | cow |
| 产品应用 | WB=1:1000-10000 ELISA=1:1000-10000 IHC-P=1:100-1000 IHC-F=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. |
| 分 子 量 | 900kDa |
| 性 状 | Lyophilized or Liquid |
| 浓 度 | 2mg/1ml |
| 免 疫 原 | Full length plasma protein: |
| 亚 型 | IgG |
| 纯化方法 | affinity purified by Protein A |
| 储 存 液 | 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. |
| 保存条件 | Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. |
HRP标记的兔抗牛IgM
抗体可以通过不同的化学试剂交联到酶（辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶）、荧光染料（FITC、PE、APC等）、生物素（Biotin）、胶体金等。抗体标记HRP为经典的方法为NaIO4氧化法，先将HRP糖基氧化成醛基，醛基与抗体的-NH2反应生成希夫氏碱反应，抗体分子与HRP分子形成稳定结构。标记的时候一般按照抗体分子与HRP分子摩尔比1:4的比例进行标记，此时,两者的质量约为1:1。
1. 抗体/蛋白的HRP标记（NaIO4氧化法）
标记以2mg抗体为例。
1.1 抗体/蛋白的处理
待标记抗体/蛋白在50mM碳酸盐缓冲液 (0.015M Na2CO3，0.035M NaHCO3，pH9.6) 中透析，其间换液2次，抗体/蛋白浓度调整为2mg/ml；或者将高浓度的抗体用0.5M碳酸盐缓冲液(0.15M Na2CO3,0.35M NaHCO3 ,pH9.6)稀释到2mg/ml，如果原抗体/蛋白溶液中含有Tris、NH4+等游离氨基的试剂，必须透析除去。
1.2 HRP酶的氧化
1.2.1 称取2mg HRP干粉(Frdbio)溶于100 μL ddH2O 中。
1.2.2 称取 NaIO4 21mg，溶于1 mL的ddH2O中，吸取100μL NaIO4溶液与100μL的HRP溶液缓慢混合，4℃下静置 30min，此时溶液为绿色。
（注意：此后的操作均在避光条件下进行。）
1.2.3 吸取２µL乙二醇缓慢加入氧化后的HRP溶液，室温避光静置 30min，此时溶液为褐色。
1.3 抗体的标记
1.3.1 将氧化好的HRP溶液直接加入到已处理好的抗体/蛋白溶液中，室温反应２h。
1.3.2 称取0.4mg的NaBH4，溶解于20µL的 ddH2O中，全部加入上步反应液中，4℃静置 2h，每30min摇动一次。
1.3.3 PBS(pH7.2)透析过夜，标记液中加入体积比30%～50%的甘油，混匀后置于-20℃保存。
2. 抗体/蛋白的HRP标记（戊二醛法）
上一篇：HRP标记的兔抗小鼠k链
025-65010873
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