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标题:过氧化氢(H2O2)检测试剂盒
产品概述
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒
测定意义:
H2O2是生物体内常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、丙酮60mL、浓盐酸10mL、研钵和冰。
试剂的组成和配制:
试剂一:丙酮60mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入10mL浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂4℃保存;
试剂三:15mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:60mL×1瓶,4℃保存;
H2O2提取:
1、细菌、细胞或组织样品的制备
收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每200万细菌或细胞加入400μL试剂一,超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
称取约0.1g组织,加入1mL试剂一进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心10min,取全部上清液(注意吸取干净),置冰上待测。
2、血清(浆)样品
按照每100μL血清(浆)加入1mL试剂一的比例充分混匀。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
测定步骤和加样表(临用前将试剂二、三和四37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min):
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
样本 | 吸取的量为全部上清液 |
|
试剂一 |
| 1000 |
试剂二 | 100 | 100 |
试剂三 | 200 | 200 |
4000g,常温离心10min,弃上清,留沉淀
试剂四 | 1000 | 1000 |
加入试剂四溶解沉淀后,室温静置5min,倒入比色皿中,415nm处,对照管调零,记录测定管吸光度。
过氧化氢(H2O2)检测试剂盒
025-65010873
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