大鼠5-羟吲哚醋酸（5-HIAA）ELISA试剂盒

标题：大鼠5-羟吲哚醋酸（5-HIAA）ELISA试剂盒

产品概述

产品名称：大鼠5-羟吲哚醋酸（5-HIAA）ELISA试剂盒

产品规格：48T、96T

保存温度：2-8℃冷藏

有效期：6个月

英文缩写：5-HIAA
种属:大鼠ELISA试剂盒
检测波长: 450 nm
所需样本体积: 50-100ul
适用范围：仅供科研
库存：现货

一、实验前准备

1. ‌试剂平衡‌：将试剂盒从2-8℃冷藏环境取出，室温平衡15-30分钟；若浓缩洗涤液有结晶，可水浴加热助溶，不影响实验结果。

2. ‌试剂配制‌：将20×浓缩洗涤液按‌1:20‌比例用蒸馏水稀释，即1份洗涤液加19份蒸馏水，混匀备用。

3. ‌样本预处理‌：不同样本需提前处理：

• 血清：血液自然凝固后2000-3000转/分离心10-20分钟，取上清

• 血浆：用EDTA/柠檬酸钠/肝素抗凝，离心后取上清

• 组织匀浆：用PBS匀浆后离心取上清，可-20℃冻存避免反复冻融

二、具体操作步骤

1. ‌加样‌：设置分子模型孔、样本孔和空白孔：

• 分子模型孔：每个孔加入对应浓度的分子模型50μL

• 样本孔：先加待测样本50μL，样本不够的情况下可以进行稀释

• 空白孔：不加任何试剂

2. ‌加酶温育‌：除空白孔外，每孔加入HRP标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃恒温箱/水浴锅温育60分钟。

3. ‌洗板‌：弃去孔内液体，在吸水纸上拍干；每孔加满洗涤液，静置1分钟后甩干，重复洗板5次（手工/自动洗板机均可）。

4. ‌显色‌：每孔依次加入底物A、底物B各50μL，轻轻混匀后37℃‌避光孵育15分钟‌。

5. ‌终止测定‌：每孔加入50μL终止液，15分钟内用酶标仪在‌450nm波长‌下读取每孔的吸光度（OD值）。

三、结果计算

1. 以分子模型浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，绘制标准曲线；推荐使用Curve Expert等专业软件计算曲线拟合方程。

2. 根据样本OD值从标准曲线中查出对应浓度，再乘以样本稀释倍数（默认5倍），得到样本中5-HIAA的实际浓度。