碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗豚鼠IgM 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。二抗还必须对应一抗的类和亚类。

碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗长爪沙鼠IgG 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。预吸附是为提高抗体特异性而引入的额外步骤，是利用具有潜在交叉反应性的物种制备固定血清蛋白，使二抗混合物通过含有这种固定血清蛋白的基质。

碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗水貂IgG 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。预吸附处理可降低二抗与细胞和组织样品中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应的风险。

罗丹明标记的羊抗大鼠IgG 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。预吸附二抗是同时使用多种一抗及其相应的二抗进行多色实验的理想选择。预吸附处理可降低二抗与细胞和组织样品中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应的风险。

罗丹明标记的小鼠抗大鼠IgG 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体,而一抗识别底物。这样，当一抗结合到底物上，就可以通过二抗检测出来。

罗丹明标记的兔抗大鼠IgG 抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体,如今的设计一般是二抗带上可检测标记，再来检测一抗。