二抗还必须对应一抗的类和亚类。尤其是一抗是均质的单克隆抗体时，这点 特别重要。例如，一些一抗分离类型是小鼠IgM，而有一些是IgG。IgM通常占血清免疫球蛋白的10%。IgM抗体在大多数抗原的早期免疫反应中起着重要的作用，由于其体积较大，很大程度上局限于血浆中。 Alexa Fluor 647标记的兔抗鸡IgM

常用的小分子抗体有单链抗体、单域结构、双特异性抗体、免疫粘连素、催化抗体等。生物素是一种水溶性维生素，一般归类为B复合维生素，又称维生素B4。 Cy5.5标记的兔抗鸡IgG

购买二抗时注意分别选择抗小鼠IgM和小鼠IgG的抗体。 小鼠IgG抗体还可以分为各种亚类，如IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG2c，IgG3。 PE-Cy5.5标记的兔抗鸡IgM

虽然可购买能识别所有亚类的一般的抗小鼠IgG二抗，但尽可能购买抗某一特定亚类的抗体以增加特异性。大多数物种的分离类型都是IgG，物种特异性抗IgG抗体能很好地工作。但注意鸟类或禽类的免疫球蛋白为IgY。 PE-Cy7标记的兔抗鸡IgM

二抗必须能识别一抗。如果一抗是小鼠单克隆抗体，分离类型是小鼠IgG1，那么二抗必须选择抗小鼠IgG的抗体；同样，如果一抗来源于山羊，二抗必须选择抗山羊的抗体。 Alexa Fluor 647标记的兔抗鸡IgG

抗体是机体在抗原刺激下所产生的特异性球蛋白，又称为免疫球蛋白。20世纪50年代末期，电镜结果结合poler 和nisonoff 研究结果，建立了经典的免疫球蛋白单体的Y 结构模式，天然的抗体分子由4条他肽链组成对称结构，包括两条相同的重链和两条相同的轻链。 Alexa Fluor 555标记的兔抗猪IgG