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鸡红细胞的制备方法您知道吗?

更新时间:2024-02-21      浏览次数:283

 

01、心脏采血  

鸡右侧卧自然保定,从膝关节稍前下方处垂直地面进针采血。

要点:

1)采血前鸡尽可能处于自然状态。

2)垂直地面进针:刺入正确时,松开注射器,会看到注射器随心脏的自然跳动。

3)先把针全部刺入,如采不出,可以一边向上提注射器,一边采血,注意向上提注射器时速度要慢。

 

02、翅静脉采血   

1)捏住近心端,让翅静脉臌起。

2)针头斜面向上,小角度刺入翅静脉中,待出现回血时,松开近心端,固定好针头进行采血即可。

鸡红细胞如何制备?

 

1%鸡红细胞为例

把采集过动物血液的采血管依次放入卡套内,并将放置于离心机对角线的两个卡套配平,使其重量相同(相差不超过0.2g),低温离心机4000r/min,离心10分钟。离心机的使用参照离心机的操作规程。

 

1、清洗红细胞

1.1于超净台内采集上清液置于无菌血清瓶中即为血浆(不同的抗凝剂需做好标记),-20℃冷冻保存于固定区域



1.2小心吸取红细胞上方的白细胞层,并弃去。



1.3在每根吸除过白细胞的采血管中,加入和压积红细胞等体积的无菌1×PBS,并轻轻吹打混匀。



1.4混匀好的红细胞悬液转至15ml无菌离心管中,低温离心机2000r/min离心10钟。



1.5吸取上清液并弃去。



1.6   加入和压积红细胞等体积的无菌1×PBS,并轻轻吹打混匀。低温离心机2000r/min离心10分钟。重复1.5-1.6步骤一次,吸取上清液并弃去即为红细胞原液。



2、制作红细胞悬液根据所需的红细胞百分比浓度,在血清瓶中加适量2-8℃保存的阿氏液和红细胞原液,制成1%的鸡红细胞悬液。

 

保存方法

1%鸡红细胞保存条件:2-8℃,30天)

  

注意事项:

·         注意不要冻融

·         每天需上下轻轻颠倒混匀

·         注意无菌操作

·         2-8℃保存,尽快使用

·         尽量避免剧烈震荡


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