乙酰甫酶A（Acetyl-CoA）样本正确提取很关键

乙酰甫酶A（Acetyl-CoA）样本正确提取很关键

乙酰甫酶A广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰甫酶A汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化，经过这条通路*氧化生成二氧化碳和水，释放能量用于ATP合成。此外，乙酰甫酶A是合成脂肪酸，酮体，及其衍生物等生理活性物质的前体物质。

规格：100管/96样  50管/48样  25管/24样

保存：按说明书，详细有介绍

有效期：6个月

用途：乙酰甫酶A含量测定

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸

馏水。

测定原理

苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰甫酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和甫酶A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应，乙酰甫酶A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰甫酶A含量的高低。

乙酰辅酶 A 的提取

1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测