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丙烯葡聚糖凝胶 S 系列现货销售
更新时间:2022-02-24   点击次数:283次

丙烯葡聚糖凝胶 S 系列现货销售


丙烯葡聚糖凝胶系列填料是烯丙基葡聚糖和 N,N'-亚甲基双丙烯酰胺的交联共聚物,平均粒径为 50μm,同时增加了基体的刚性,确保快速流动特性和高分辨率。


操作步骤

3.1 装柱

(1)让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液,对所有的缓冲液进行脱气处理。 (2)检查层析柱所有部件,特别是过滤网,密封圈,螺旋塞是否紧密,玻璃管是否干净和完整。

(3)根据需要量取相应量的凝胶,用去离子水清洗掉 20%乙醇。

(4)将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位,务必使底端无气泡。

(5)用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。

(6)打开蠕动泵,让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过,使柱床稳定(注意压力不要超过填料最大耐压)。

3.2 平衡

上样前平衡层析柱至少 5-10 个柱体积,直到记录仪基线变得平稳为止(流出液的 pH 值和电导值等于上柱 Buffer 的 pH 值和电导值)。

3.3 上样

(1)样品用平衡液配制,样品一定要离心或过滤后上样(0.45um 滤膜),如果样品盐浓度太大,则需要处理后再上样。
(2)推荐的上样量不超过柱体积的 5%。

3.4 洗脱

用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。

3.5 再生

一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。在一些应用中,诸如变性蛋白质或脂质体物质在再生过程中洗脱不掉。出现下面这些情况,是必须需要清洗再生的:

(1)背压增加;

(2)色谱柱顶部的颜色变化;

(3)分辨率降低;

(4)转换接头和凝胶表面之间出现空隙。

如果观察到压力增大,在开始柱清洁程序之前先检查管路中的各个过滤阀、过滤膜是否被污染,然后通过用 0.1M NaOH 洗涤柱子,除去沉淀的蛋白质,非特异性结合的蛋白质和脂蛋白。


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