酵母基因组DNA提取试剂盒使用注意事项

酵母基因组DNA提取试剂盒使用注意事项

本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和*的缓冲液系统，提取酵母基因组 DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司新型材料，能够高效专一吸附 DNA，可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组 DNA 片段大，纯度高，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作，包括酶切、 PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。

操作步骤：使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

注意事项：
1、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量下降。
2、若试剂盒中的溶液出现沉淀，可在 65℃水浴中重新溶解后再使用，不影响提取效果。
3、如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况，可适当延长离心时间。
4、洗脱缓冲液的体积最好不少于 50ul，体积过小会影响回收效率；洗脱液的 pH 值对洗脱效率也有影响，若需要用水做洗脱液应保证其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 将水的 pH 值调至此范围)， pH 值低于 7. 0 会降低洗脱效率。 DNA 产物应保存在-20℃，以防 DNA 降解。
5、DNA 浓度及纯度检测：得到的基因组 DNA 片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的 DNA 片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA 应在 OD260 处有显著吸收峰， OD260 值为 1.0 相当于大约 50μg/ml 双链 DNA、40μg/ml 单链 DNA。OD260/0D280 比值应为 1.7-1.9，如果洗脱时不使用洗脱缓冲液，而使用去离子水，比值会偏低，因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值，但并不表示纯度低。

酵母基因组DNA提取试剂盒