直接抗人球蛋白试剂盒操作步骤

直接抗人球蛋白试剂盒操作步骤

简要描述：直接抗人球蛋白试剂盒现货供应。用于抗球蛋白试验（Coombs试验）是测定结合在红细胞上的抗体和/或补体的主要方法。直接Coombs试验是检测体内已被抗体和/或补体致敏的红细胞。间接Coombs试验通过血清与细胞的孵育，证实抗体和/或补体与红细胞在体外的结合。根据医疗器械体外诊断试剂注册分类，本试剂暂时只用于直接抗球蛋白试验。

[检验方法]

1.     标本的收集：见[样本要求]

2.     直接抗球蛋白试验：

2.1 将1滴受检者3％红细胞悬液加入干净的小试管中（75×12mm），用盐水洗涤3次[以3400转/分(1000g)，离心1分钟]。每次洗涤后，将上清液全部倒出。

2.2 加入2滴抗IgG, C3d (多特异性)或抗IgG或抗C3d，以3400转/分(1000g)，离心15秒，用肉眼或借助光镜观察凝集，并按程度记录结果。

2.3 判断结果须持一定角度轻轻地摇动试管直到松动所有的细胞，然后反复倾斜试管，直到均匀的细胞悬液（阴性）或者凝集物（阳性）为止。

2.4 如阴性结果，在室温中放置5-10分钟，再离心一次，重读结果。这样做，阴性反应有时会变成阳性。

    注意：仅对C3d和IgA致敏红细胞有增强作用，IgG致敏细胞反而会变弱（见注意事项）。

3.     阳性对照（IgG抗D致敏细胞）：

3.1 每批新的试剂，或在4℃保存时间过长，需做阳性对照试验，至少每月一次。1滴阳性对照细胞加2滴直接抗人球蛋白试剂，离心判定结果。

3.2 在试验中，于判为阴性的试管内加入1滴阳性对照细胞，再离心，然后重悬浮，判定结果。如果zui初洗涤能充分除去所有未结合的球蛋白，结果为阳性。这是一个重要的对照，因为这是检测细胞是否洗涤充分的*方法。

3.3 阳性对照细胞（IgG抗D致敏细胞）制备： 1份市售抗D（IgG）试剂（效价≥1:8）＋1份Rh（D）阳性O型红细胞混匀，370C水浴30分钟，用生理盐水三洗，配成3％红细胞悬液，当天使用。

[检验结果的解释] 

阳性反应——出现红细胞凝集。表示红细胞上有相应抗体存在。

阴性反应——红细胞不凝集。表示红细胞没有相应抗体存在。

[检验方法的局限性]某些文献报告指出使用抗IgG测定抗体偶尔会失败，可依靠含有抗C3成分的多价抗球蛋白试剂测定。没有被IgG 测得的抗体在某些病例中可能有临床意义。抗IgG可用在抗体筛选和相容性试验中，但必须认识到它的局限性。