ATP 含量检测试剂盒现货供应

ATP 含量检测试剂盒现货供应

产品说明： ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量 代谢状态的主要参数。测定 ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。 HK 催化葡萄糖和 ATP 合成 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢 生成 NADPH ，NADPH 在 340nm 有特征吸收峰，NADPH 和 ATP 含量成正比，以此反应 ATP 含 量。

自备仪器和用品： 紫外分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水和氯仿。 

操作步骤：

 一、ATP 的提取：

 1、血清（浆）中 ATP 的提取：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积（mL）为 1：5~10 的比 例（建议取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 提取液），充分震荡，10000g，4℃离心 10min；取 上清液至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震荡混匀，10000g 4℃离心 3min，取上清，置 冰上待测（不可用于蛋白质含量测定）。 

2、组织中 ATP 的提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心 10min，取上清至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震荡混匀，10000g 4℃离心 3min，取上清，置冰上待测（不可用于蛋白质含量测定）。

 3、细胞或细菌中 ATP 的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液）， 超声波破碎 1min（冰浴，强度 20％或 200W，超声 2s，停 1s），10000g 4 ℃离心 10min；取上 清液至另一 EP 管中，加入 500μL 的氯仿充分震荡混匀，10000g 4℃离心 3min，取上清，置冰 上待测（不可用于蛋白质含量测定）

注意事项：

 1、 加入提取液离心后的上清若为浑浊为正常现象。 

2、 提取过程严格在冰浴条件下进行。 

3、 当吸光值大于 1.2 或者ΔA 测定大于 1.2 时，可以将样品稀释后进行测定。若吸光值小于 0.01， 则可以增加反应时间（5min 或 10min）来测定，标准品需要增加同样的反应时间。