经典酵母转化试剂盒专用于：酿酒酵母质粒转化实验

酵母转化试剂盒主要用于酿酒酵母质粒转化实验，该试剂盒遵循广大用户的使用习惯，分别提供PEG、LiAc和Carrier DNA溶液，PEG、LiAc均经过滤除菌，Carrier DNA经特殊优化处理，更有助于提高质粒DNA的转化效率。该试剂盒可根据实际需要灵活配制1 × LiAc溶液和转化预混液，既方便使用，又经济实惠。

感受态细胞制备：

1.活化菌种。-80 ℃保存的菌种在YPDA培养基平板上划线，30 ℃培养2-4天。

2.挑取酵母单菌落在YPDA培养基平板上划3-5 mm，30 ℃培养2-4天。

3.待酵母单菌落长至直径2 mm时，把酵母细胞接种到3 mL YPDA液体培养基中，30 ℃过夜培养。

4.第二天转接到含有30-50 mL YPDA液体培养基的三角瓶中继续培养，待OD600达到0.4-0.5，3000 rpm离心5 min，弃上清。

5.沉淀用30-50 mL的无菌的去离子水悬浮。3000 rpm离心5 min，弃上清。

6.沉淀用1.5 mL 1 × LiAc（150 μL 10 × LiAc Solution加1350 μL无菌水）重悬后转移至1.5 mL离心管中，3000 rpm离心5 min，弃上清。

注意：10 × LiAc Solution经过pH缓冲，无需添加TE作为缓冲剂。

7.加入1 mL 1 × LiAc重悬，小体积转化按照每管100 μL分装，用于文库转化不分装。

8.3000 rpm离心5 min，弃上清，感受态细胞即制备完毕。

注意：制备好的感受态好立即使用，在第8步离心前，室温放置不应超过5小时。

酵母转化原理：

像酿酒酵母,线性化的转化DNA和Pichiapastoris基因组的同源区域发生同源重组,使得线性化DNA产生稳定的转化子

这样的整合方式显示稳定性,即使多拷贝转化子在没有选择压力的情况下也很稳定.单交换事件（插入）比双交换事件（置换）发生几率更大.单插入事件中约发生1-10%概率的多插入事件.